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Beyotime碧云天lipo8000轉染試劑(c0533)現(xiàn)貨供應

更新時間:2024-04-18點擊次數(shù):1083

產品名稱:Beyotime碧云天lipo8000轉染試劑(c0533)現(xiàn)貨供應

產品貨號:c0533

產品品牌:碧云天

產品簡介:

碧云天lipo8000轉染試劑(c0533)是碧云天最新研發(fā)的一種以納米材料為基礎的zui便捷的高效細胞轉染試劑,達到甚至超過了國際主流轉染試劑的轉染效果,并且轉染過程無須任何孵育時間,實現(xiàn)了細胞轉染的至簡操作。適用于把質粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白復合物或帶負電荷的蛋白轉染到真核細胞中,也可以用于活體動物的核酸轉染以及用于基因治療。

常見問題:

1. 轉染效率低:

a. 優(yōu)化質粒與Lipo8000™轉染試劑比例,對于難轉染的細胞,可適當增加Lipo8000™轉染試劑的用量。

b. 應使用高純度、無菌、無污染物的質粒進行轉染,DNA純度方面A260/A280比值要接近1.8,通常宜控制在1.8-1.9范圍內,偏低則有可能有蛋白污染,偏高則有可能有RNA污染??梢允褂帽淘铺焐a的質粒大量抽提試劑盒(D0026)進行抽提,以保證可以獲得較高的轉染效率。

c. 貼壁細胞轉染時狀態(tài)良好,細胞密度達70-80%時才可進行轉染,過稀或過密都可能影響轉染效率,不同細胞的最佳轉染密度需要自行摸索。懸浮細胞宜在對數(shù)生長期進行轉染。

d. 需使用無抗生素和無血清培養(yǎng)液配制Lipo8000™轉染試劑和質?;騭iRNA等的混合物。

e. 轉染后培養(yǎng)時間不足,而被誤以為轉染效率偏低。不同細胞轉染后至顯著表達所需要培養(yǎng)的時間通常為24-48小時。

f. 檢查細胞是否有支原體感染,支原體感染會影響細胞增殖,并很可能影響轉染效率。

g. 使用傳代次數(shù)相對較少的細胞,細胞傳代次數(shù)太多,對轉染效率會有一定的影響。

h. 如果沒有檢測到目的蛋白表達,應該仔細核對轉染質粒的測序結果,確保測序結果和讀碼框wan全正確。啟動子、復制起始位點、質粒大小都會影響基因表達水平。

i. 如果靶基因的敲減(knockdown)效果欠佳,應該考慮嘗試設計不同的siRNA。

2. 出現(xiàn)一定程度的細胞毒性:

a. 轉染前,細胞至少鋪板 18-24 小時。

b. 質粒用量不變,Lipo8000™轉染試劑的用量減少 25%。例如通常六孔板每孔使用 2.5μg 質粒,4μl Lipo8000™,如果發(fā)現(xiàn)有細胞毒性,六孔板每孔可以嘗試使用 2.5μg 質粒,3μl Lipo8000™,此時經(jīng)測試對于轉染效率沒有很明顯的影響。

c. 減少質粒用量,按照比例減少 Lipo8000™轉染試劑;或在前者的基礎上 Lipo8000™轉染試劑用量再減少 25%。

d. 檢查是否轉染時細胞密度太低,Lipo8000™轉染時細胞密度以 70-80%為佳。

e. 某些細胞對 Lipo8000™轉染試劑比較敏感,可以在轉染后 4-6 小時更換細胞培養(yǎng)液,轉染效率無顯著影響。

f. 檢查細胞是否有支原體等微生物污染。

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c0533-0.5ml

lipo8000轉染試劑

0.5ml

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