在培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的時(shí)候,偶爾會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長(zhǎng)得非常密集,有的地方卻太稀疏。雖然這對(duì)于常規(guī)培養(yǎng)并不算大問(wèn)題,但有時(shí)則可能影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
所以一旦遇到貼壁不勻,建議排查原因并優(yōu)化操作方案。那么,造成細(xì)胞貼壁不均勻的原因有哪些呢?本期內(nèi)容一起來(lái)跟著小編的腳步學(xué)習(xí)一下吧!
情況一:局部生長(zhǎng)密集,密集處呈不規(guī)則分布
原因:一般是接種時(shí)沒(méi)有混勻,或者細(xì)胞傳代時(shí)沒(méi)有消化che底從而形成細(xì)胞團(tuán)塊導(dǎo)致的
解決方案:繼續(xù)培養(yǎng)1-2天,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,重新消化接種,接種時(shí)注意使用十字法或8字法混勻,接種后顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞是否分散為單個(gè)細(xì)胞。
情況二:培養(yǎng)器皿中央生長(zhǎng)密集,邊緣稀疏
原因:十字法或8字法混勻時(shí)搖晃次數(shù)過(guò)多,液體形成漩渦所導(dǎo)致
解決方案:繼續(xù)培養(yǎng)1-2天,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,重新消化接種。在混勻時(shí)搖晃5-6次即可。
情況三:細(xì)胞在培養(yǎng)器皿的半邊生長(zhǎng),形成明顯分界線
原因: 這可能是培養(yǎng)箱架子不平造成的
解決方案:可通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱架子以保持水平解決。
情況四:細(xì)胞形成同心圓,并靠邊緣生長(zhǎng)
原因:這是由于培養(yǎng)箱風(fēng)扇故障或設(shè)備震動(dòng)導(dǎo)致
解決方案:在培養(yǎng)器皿下面墊泡沫板或在架子上放重物可以有所緩解,檢查培養(yǎng)箱風(fēng)扇是否正常運(yùn)轉(zhuǎn)。
以上就是有關(guān)于細(xì)胞貼壁不均勻的原因有哪些的問(wèn)題解答,對(duì)于前兩種情況,一般是傳代操作造成的,重新接種即可解決;而后兩種情況是硬件設(shè)施造成的,則需要調(diào)試設(shè)備。如果你還有其他問(wèn)題請(qǐng)咨詢百奧創(chuàng)新客服!