日韩免费视频一区二区三区视频,久久人妻内射无码一区三区,日韩第一精品二区三区,成人无码久久久久毛片

免費咨詢熱線:
技術文章
首頁 > 技術中心 > His-tag的由來

His-tag的由來

 更新時間:2024-09-14 點擊量:575

組氨酸標簽也稱His-tag,是一種簡單、應用泛的純化標簽,具有六個或更多連續(xù)的組氨酸殘基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能構成表位利于檢測;二是構成的結構特征(結合配體)利于純化。His標簽我們經常會看到,做蛋白親和純化的小伙伴們應該就沒有沒聽過His名號的吧??墒撬烤箯暮味鴣砟??

一、起源

1975, J. Porath等人的研究論文中,實驗者將金屬螯合親和層析(簡稱MCAC)技術應用于蛋白分離。研究者首先將金屬離子(如Cu2+、Ni2+等)固定到IDA-衍生的凝膠上,形成金屬螯合親和層析介質。利用這種介質,研究者進行了蛋白質的吸附實驗,探究不同蛋白質與金屬離子的親和性。實驗發(fā)現,某些蛋白質可以特異性地結合到固定化的金屬離子上,而其他蛋白質則沒有這種結合能力。通過改變溶液的pH值或使用競爭性配體,可以有效地從親和層析介質上洗脫結合的蛋白質。這項技術利用了蛋白質上的某些氨基酸殘基(如組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸等)與金屬離子(如鎳、銅、鋅等)的親和作用,通過這些金屬離子固定在帶有亞氨基二乙酸(iminodiacetic acid, IDA)或其他配體的樹脂上,實現對蛋白質的親和層析。這項研究成果的發(fā)表標志著親和層析技術在蛋白質分離領域的應用邁出了重要的一步。它不僅為后來的研究人員提供了一種新的蛋白純化實驗方法,而且為理解蛋白質結構和功能提供了新的視角。

His-tag的由來

二、His tag的雛形

1988年,Smith等人提出了在蛋白質N-末端添加特定的金屬螯合肽(Chelating Peptide, CP),以增強其與固定金屬離子的結合能力,從而提高純化效率。這種方法被稱為CP-IMAC,它通過在目標蛋白質上引入一個CP序列,使得蛋白質能夠通過IMAC被特異性地純化。

實驗人員設計了螯合肽His-Trp與促黃體激素釋放激素(LHRH)類似物2-10 LHRHN-末端融合表達,結果融合蛋白可以與Ni2+形成配位復合物并具有高親和性。此外,實驗人員設計了His-Trp-胰島素原作為重組CP-蛋白質模型,利用該模型研究了其在大腸桿菌中表達,研究其與固定化Ni2+的結合和洗脫情況。

His tag的發(fā)展

1989年,瑞典斯德哥爾摩理工學院生物化學與生物技術系Ljungquist C等人也利用基因融合方法,將目標蛋白的基因與編碼親和肽段Ala-His-Gly-His-Arg-Pro的基因片段融合,為了使表達的融合蛋白可以與固定化金屬離子(Zn2+)結合而利用親和色譜法(IMAC)進行純化,研究者合成了編碼親和肽段的連接體,以上述編碼親和肽段為基本單位,分別做兩次,四次串聯(lián)聚合,這樣制備出分別含有2個、4個和8His氨基酸的親和肽段,然后將這肽段與編碼雙結構域蛋白A分子ZZ的基因的3'端和編碼β-半乳糖苷酶的基因的5'端融合。研究發(fā)現,不含有或兩個His的親和肽段的融合蛋白與固定化Zn2+的結合能力較弱,而含有4個或8His的親和肽段的融合蛋白則顯示出較強的結合作用。通過pH梯度改變,發(fā)現ZZ融合蛋白可以根據親和肽His的數量多少在不同的pH值下從樹脂上洗脫,His數越多,結合力越強,洗脫的pH值越低。

三、His-tag相關產品推薦



久久久精品国产亚洲av高清涩受-国产精品一区二区三区成人-欧美日韩国产精品视频一区二区三区-大陆美女阴户特写毛片| 成人精品av一区二区三区-日本久久精品在线视频-亚洲精品自拍资源在线播放-青青草原在线视频资源| 中文人妻久久精品一区二区-国产男女猛烈无遮挡免费视频网址-午夜福利成人一区二区三区在线-岛国av一区二区国产精品| 九色蝌蚪国产极品自拍-国产夫妻自拍后入视频-国产一级黄色片在线观看-亚洲欧洲日产国产av| 少妇特殊按摩高潮连连-国产成熟美女三级视频-亚洲男人天堂成人免费-国产粉嫩美女在线观看| 精品国产中文字幕在线视频-性生活视频在线观看欧美-成年人免费黄片内射国产-国产欧美另类精品久久久| 岛国av大片在线观看-欧美高清一级二级三级-中文字幕中文字幕777-国产日韩亚洲精品视频| 91免费视频完整版高清-久久青草国产日韩资源-黄色激情网站免费提供-国产精品麻豆三级一区视频| 亚洲香蕉久久一区二区三区四区-国产夫妻内射一级一片-成人午夜福利片免费观看-一区二区三区四区黄色网| 久久99精品成人免费毛片-中文字幕日韩精品欧美-免费观看黄片一区视频-国产亚洲蜜臀av在线观看| 日本午夜av免费久久观看-国产精品夜色一区二区三区不卡-亚洲高清自有码中文字-青青草国产成人在线观看| 久热在线视频精品99-国产欧美日韩久久午夜-在线观看亚洲精品91-黄色大片一区二区久久精品视频| 国产一区二区在线观看不卡-日本高清中文字幕有码在线-日本女优在线观看一区二区三区-在线观看免费四虎av| 国产欧美日韩精品一区二-久久精品国产精品青草色艺-人妻熟妇视频一区二区不卡-亚洲国产精品第二在线播放| 久久网站黄色一级视频-精品极品三级久久久久电-国产精品天堂蜜av在线播放-国产传媒免费在线观看| 尤物视频在线观看网址-欧美午夜精品久久福利-久久这里只有精品视频5-国产精品成人综合色区| 日韩国产自拍在线视频-亚洲av午夜激情在线播放-午夜福利你懂的在线观看-少妇特殊按摩高潮惨叫| 亚洲成人av综合在线-日韩精品久久久中文字幕人妻-国产精品无套白嫩剧情-五月婷婷久久激情综合| 精品国产日韩一区三区-成人激情毛片免费在线看-国产一区二区高清日韩-日韩成人黄片免费在线观看| 免费观看一区二区av蜜桃-免费一级特黄久久大片-每日更新日韩中文字幕有码-97视频在线观看午夜| 京香一区二区三区中文字幕-国内在线精品一区二区三区-久久亚洲精品色噜噜狠狠-亚洲成av人一区二区三区| 午夜狂情三级伦理涩之屋-亚洲国产精品美女嫩模综合在-久热在线观看免费视频-国产精品伦子一区二区三区| 久久精品一区二区三区激情-男人天堂手机成人在线-激情五月色婷婷中文字幕-国产精品久久久久久人四虎| 亚洲天堂av免费在线看-操老熟女中国老太自拍-夫妻性生生活免费视频-日韩av有码高清在线| 少妇被躁潮到高潮无人码-日本欧美一级二级三级不卡-国产一区视频二区视频-亚洲无人区码一二三区别| 99久久免费精品老色-白色白色在线观看视频-91麻豆精品在线播放-日本人妻少妇中文字幕| 国产精品一二三四区无线乱码-精品亚洲国产成人精品-国产精品蜜桃一区二区三区-黄片av在线免费播放| 日韩亚洲分类视频在线-熟妇人妻久久中文字幕电-久久麻传媒亚洲av国产-精品丰满熟妇高潮一区| 国产精品中文字幕久久-国产精品一区二区在线免费-韩国午夜三级一区二区-亚洲国产成人精品一区刚刚| 日韩精品极品系列在线免费视频-国产中文字幕有码视频-日韩一区二区免费电影-成人夜晚在线观看视频| 台湾香港a毛片免费观看-国产美女口爆吞精的后果-亚洲天堂成人免费在线-国模在线视频一区二区三区| 精品人妻一区二区三区久久91-久久精品亚洲国产av搬运工-日本熟女人妻一区二区三区-亚洲国产精品高清线久久| 亚洲综合不卡一区二区三区-中文字幕一区二区人妻秘书-国产免费午夜精品理论-中文字幕人妻精品一区二区| 免费av毛片在线观看-av大全网站免费一区二区-欧美激情亚洲一区中文字幕-亚洲中文字幕久久精品| 国产精品毛片一区二区三-av蜜臀永久免费看片-三级国产美女搭讪视频-亚洲中文字幕在线观看一区二区| 亚洲黄色美女视频大全-成上人色爱av综合网-亚洲一区二区三区激情在线观看-久久91精品国产一区二区| 加勒比中文字幕久久av-久久黄色美女三级久一点黄-国产精品无套高潮久久-久久婷婷综合色拍亚洲| 久热视频在线免费观看-亚洲一区二区日韩综合久久-免费观看在线观看青青草视频-精品一区二区亚洲一区二区血炼| 邻居少妇毛多水多太爽了-男人天堂手机在线视频-国产精品国产三级国产专播-韩国女主播福利视频一区二区| 一本色道久久综合亚洲精-亚洲精品一区二区三区乱码-性生活高清免费视频免费-99热这里只有的精品3| 日本一区二区三区四区在线-黄色激情免费看国产看片-微拍福利一区二区视频-日本高清免费不卡观看|