日韩免费视频一区二区三区视频,久久人妻内射无码一区三区,日韩第一精品二区三区,成人无码久久久久毛片

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > 小鼠腦組織解離試劑盒使用方法

小鼠腦組織解離試劑盒使用方法

 更新時(shí)間:2025-02-25 點(diǎn)擊量:220

百奧益康小鼠腦組織解離試劑盒貨號:BA3305適用于小鼠腦組織的細(xì)胞懸液的分離制備,本產(chǎn)品利用酶溫和、快速有效地破壞細(xì)胞外基質(zhì),釋放細(xì)胞,從而生成單細(xì)胞懸浮液。制備的單細(xì)胞懸液可用于單細(xì)胞測序、細(xì)胞培養(yǎng)或其他細(xì)胞相關(guān)檢測。百奧益康小鼠腦組織解離試劑盒貨號:BA3305怎么使用呢?讓我們一起來看看小鼠腦組織解離試劑盒的使用方法吧!

一、材料準(zhǔn)備

1. 儀器:水浴鍋(定期手動搖晃混勻)或雜交爐(轉(zhuǎn)速 20 ~ 30 轉(zhuǎn)/分鐘)、水平離心機(jī)。

2. 試劑:PBS、FBS、RPMI 1640 培養(yǎng)基。

3. 耗材:低吸附槍頭、離心管、20 μm 70 μm 的細(xì)胞篩。

二、操作步驟

準(zhǔn)備工作:水浴鍋或雜交爐設(shè)置到 37℃、配制含 5% FBS PBS。 切取新鮮組織約 200 mg(黃豆粒?。?,如圖 1。

小鼠腦組織解離試劑盒使用方法

1 新鮮組織樣圖

1. 取一個(gè)5 mL 離心管,加入2160 μL Buffer A,放入用PBS 清洗干凈的組織樣本,并剪碎。

2. 添加800 μL Enzyme B 10 μL Enzyme C,顛倒混勻。

3. 放在37℃水浴鍋或雜交爐中20 ~ 30 min。消化過程中,使用水浴鍋每隔3 ~ 5 min 手動搖晃混勻。使用雜交爐轉(zhuǎn)速20 ~ 30 轉(zhuǎn)/分鐘左右。

4. 每隔3 ~ 5 min 質(zhì)檢一次細(xì)胞懸液,根據(jù)細(xì)胞總量及活性等確定消化停止時(shí)間。

5. 消化完成后,用70 μm 細(xì)胞篩進(jìn)行過濾,收集濾液于新的15 mL 離心管中。

6. 3 mL RPMI 1640 培養(yǎng)基或 5% FBS PBS 于消化的離心管中,上下顛倒涮洗管壁,涮洗液同樣經(jīng)過同一個(gè)70 μm 細(xì)胞篩進(jìn)行過濾,收集濾液于第5 步的15 mL 離心管中。

7. 將收集液于4℃,300 ×g 離心5 min,棄上清。

8. 5 mL 5% FBS PBS 重懸沉淀,吹打混勻。

9. 放入水平離心機(jī),4℃,300 ×g 離心5 min,棄上清。

10. 用含5% FBS PBS 重懸沉淀至2 mL

11. 加入1 mL DRS(細(xì)胞碎片去除緩沖液),用5 mL 移液器緩慢吹打混勻10 次。不要渦旋振蕩。

12.沿管壁緩慢加入3 mL PBS,輕輕覆蓋在最上層,千萬不要混勻,如圖2

小鼠腦組織解離試劑盒使用方法

        圖2                                                                 3

13. 務(wù)必使用水平離心機(jī),并設(shè)置為居中的加速度和減速度,4°C,3000 ×g,離心20 min。

14. 離心后,緩慢取出離心管。溶液分成3 層。緩慢吸出全部上清液(優(yōu)先吸出碎片層),保留細(xì)胞沉淀(上清盡量wan-quan去除干凈),如圖3 和圖4。

注:離心管要輕拿輕放,確保分層明顯,不同層的溶液間不互相混合。

小鼠腦組織解離試劑盒使用方法

4 小鼠腦細(xì)胞碎片去除示意圖

15. 向沉淀中加入適當(dāng)體積的含5% FBS PBS,加入三倍體積的紅細(xì)胞裂解液(BA3311),冰上裂紅5 min。具體可以參考BA3311 紅細(xì)胞裂解液說明書。

16. 加入等體積的PBS 混勻,終止裂紅,4°C,450 ×g,離心5 min,棄上清。

17. 10 mL 5% FBS PBS 重懸沉淀,吹打混勻,4℃,300 ×g 離心5 min,棄上清。

18. 50 µL ~ 2 mL 5% FBS PBS 重懸沉淀,根據(jù)所需的細(xì)胞濃度調(diào)整重懸液的體積。

19. 若有明顯細(xì)胞結(jié)團(tuán),則使用20 μm 細(xì)胞篩進(jìn)行過濾,收集濾液于新的離心管中。若無明顯細(xì)胞結(jié)團(tuán),則可跳過此步驟。

20. 用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對細(xì)胞懸液進(jìn)行質(zhì)控并記錄。質(zhì)控結(jié)束后請立即進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

在使用的過程中,請按照百奧益康小鼠腦組織解離試劑盒貨號:BA3305的使用方法來進(jìn)行使用,若有任何問題,請聯(lián)系百奧益康試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!

小鼠腦組織解離試劑盒使用方法




亚洲av乱码一区二区-九九免费在线观看视频| 亚洲欧美精品在线一区-99热国产在线手机精品99| 91九色蝌蚪丝袜人妻-国产精品9999网站| 国产aa视频一区二区三区-国产精品久久久久久久毛片动漫| 欧美三级韩国三级日本三斤-日本不卡一区不卡二区| 国产av一区二区三区日韩接吻-av网址在线播放网站| 夜夜久久国产精品亚州av-欧美大屁股一区二区三区| 日韩中文字幕v亚洲中文字幕-日韩亚洲av免费在线观看| 国产av一区二区三区日韩接吻-av网址在线播放网站| av网址在线直接观看-黄色av全部在线观看| 亚洲欧美日韩国产一区二区三区-国产欧美日韩一区二区免费| 青青操视频在线观看国产-欧美成人乱码在线观看| 国产精品美女在线网址-久草免费福利在线观看视频| 成人av一区二区蜜桃-亚洲色图激情人妻欧美| 久久亚州天堂一区二区-色噜噜色哟哟一区二区三区| 亚洲女人黄色录像一区-日韩av电影在线免费看| 日韩综合精品一区二区-丝袜美腿熟女人妻经典三级| 日本中文字幕永久在线人妻蜜臀-欧美一区二区的网站在线观看| 成人av一区二区蜜桃-亚洲色图激情人妻欧美| 亚洲欧洲一区二区福利-亚洲欧美日韩高清中文| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 久久免费观看归女高潮特黄-黄色av一本二本在线观看| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 欧美三级韩国三级日本三斤-日本不卡一区不卡二区| 亚洲日本一区二区三区黄色电形-中文字幕乱码免费熟女| 午夜日韩精品在线视频-亚洲网老鸭窝男人的天堂| 日韩精品一区二区三区十八-日韩人妻少妇一区二区三区| 天天日天天干天天综合-99久久综合狠狠综合久久| 亚洲国产精品日韩欧美-国产又粗又硬又大爽黄| 国产美女网站在线观看-国产精品亚洲综合网69| 日韩综合精品一区二区-丝袜美腿熟女人妻经典三级| 亚洲精品激情一区二区-久久成人国产欧美精品一区二区| 亚洲一区二区少妇激情-国产精品美女久久高潮| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 欧美亚洲另类久久久精品-国产精品一区二区亚洲推荐| 青青操大香蕉在线播放-国产亚洲欧美精品在线观看| 亚洲欧美一区二区中文-台湾中文综合网妹子网| 在线成色中文综合网站-国产二区精品视频在线观看| 国产免费一区二区三区不-日本少妇免费一区二区三区|