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細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),直接影響細(xì)胞存活率和活力,關(guān)系到后續(xù)細(xì)胞實驗?zāi)芊癜凑沼媱澯行У剡M行。掌握好細(xì)胞凍存的小Tips,有助您做好細(xì)胞培養(yǎng)式樣,讓我們一起來看看吧!一、細(xì)胞凍存的基本原則細(xì)胞凍存遵循“慢凍”原則:讓細(xì)胞在超低溫環(huán)境中緩慢進入“冬眠”狀態(tài),暫時停止其代謝活動。目的是保存細(xì)胞樣本,方便復(fù)蘇。二、細(xì)胞凍存的注意事項1.溫度控制不穩(wěn)定可能導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低二甲基亞砜(DMSO)或甘油常作為冷凍保護劑,保護細(xì)胞。DMSO能快速穿透細(xì)胞膜進入細(xì)胞,降低冰點,延緩凍...
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在選擇ELISA試劑盒時,不同的用戶往往有不同的選擇標(biāo)準(zhǔn),無論是靈敏度、樣本類型還是簡便性,核心標(biāo)準(zhǔn)是ELISA試劑盒的重現(xiàn)性。一、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類一般來說,生產(chǎn)廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬,ELISA試劑盒種屬:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待檢樣本種類:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿等。二、試劑盒的檢測范圍就是標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),對于高濃度樣本,需要先進行預(yù)實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。三...
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一、實驗小鼠的選擇挑選實驗小鼠一般都是根據(jù)實驗要求來篩選品系、品種,在小鼠年齡、體重、生理健康等方面要格外注意?;旧现灰獫M足以下注意事項,就能挑選到合適滿意的小鼠。1、首先要考慮小鼠是否符合國家標(biāo)準(zhǔn)。2、按照實驗?zāi)康暮鸵髞磉x擇。3、不同季節(jié)和晝夜不同時間,動物機體反應(yīng)性有一定改變4、不同種、同種而不同品系的小鼠對同一實驗處理反應(yīng)有很大差別。5、年齡應(yīng)盡可能一致,體重應(yīng)大致相近,一般不應(yīng)相差10%。6、小鼠性別,在實驗研究中,如無特殊要求,一般宜雌雄各半,以避免由于性別差異...
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組氨酸標(biāo)簽也稱His-tag,是一種簡單、應(yīng)用廣泛的純化標(biāo)簽,具有六個或更多連續(xù)的組氨酸殘基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能構(gòu)成表位利于檢測;二是構(gòu)成的結(jié)構(gòu)特征(結(jié)合配體)利于純化。His標(biāo)簽我們經(jīng)常會看到,做蛋白親和純化的小伙伴們應(yīng)該就沒有沒聽過His名號的吧??墒撬烤箯暮味鴣砟兀恳?、起源1975年,J.Porath等人的研究論文中,實驗者將金屬螯合親和層析(簡稱MCAC)技術(shù)應(yīng)用于蛋白分離。研究者首先將金屬離子(如Cu2+、Ni2+等)固定到IDA-衍生的凝膠...
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一、前言經(jīng)常做實驗的小伙伴都知道,從事細(xì)胞培養(yǎng)工作時都有可能面臨細(xì)胞受到污染的境況。對于細(xì)胞的受污染問題,最為緊要的在于防范,因為一旦細(xì)胞受到污染,欲挽回已十分艱難,即便成功挽回,細(xì)胞的狀態(tài)亦會受損,進而對實驗結(jié)果造成影響。因此,讓我們首先探討一下如何有效地進行預(yù)防。生物安全柜是細(xì)胞處理的主要場所,而培養(yǎng)箱是細(xì)胞生長的主要場所,所以細(xì)胞污染通常就發(fā)生在這兩個地方。那么在使用生物安全柜和培養(yǎng)箱時如何做好預(yù)防措施呢?二、措施1.所有進入安全柜的東西都要盡可能保證無菌如果實驗室條件...
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